Sự cần thiết:

Lạc là một cây lương thực quan trọng được trồng ở hơn 100 quốc gia với tổng sản lượng 38 triệu tấn vào năm 2010. Hạt lạc là nguồn phong phú của dầu (48-50%), protein (25-28 %), vitamin và khoáng chất và nó cung cấp 564 kcal năng lượng từ 100g hạt giống.

Cây lạc là cũng là cây lương thực được trồng rất rộng rãi ở nước ta với mục đích chính là lấy hạt. Hiện nay ở nước ta, sau khi thu lấy hạt, vỏ lạc được coi là phế phẩm nông nghiệp thường được người dân dùng làm nhiên liệu đốt thay củi. Qua các công trình nghiên cứu của các tác giả trên thế giới, chúng ta thấy rằng flavonoid chiết xuất từ vỏ quả có hoạt chất chính luteolin có nhiều tác dụng sinh học tốt. Các tác dụng đáng chú ý là chống oxy hóa, chống viêm, kháng khuẩn và chống ung thư, ức chế xanthine oxidase. Nhiều sản phẩm đã được các công ty có uy tín trên thế giới đã nghiên cứu và bào chế thành công sản phẩm sử dụng luteolin để chống lão hóa, chống viêm, phòng ngừa hỗ trợ điều trị ung thư.

Ở nước ta chưa có bất kỳ một nghiên cứu xác định thành phần hóa học, và tác dụng sinh học từ vỏ quả lạc. Trong khi đó ngành công nghiệp chiết xuất Trung Quốc và một số nước trên thế giới đã biết tận dụng khai thác phế phẩm nông nghiêp vỏ lạc để chiết xuất flavonoid, luteolin làm nguyên liệu sản sản xuất thuốc, đem lại nhiều lợi ích cho nền kinh tế.

Như vậy, nếu chúng ta tận dụng được nguồn nguyên liệu phế phẩm nông nghiệp sẵn có và rẻ tiền này để phát triển sản xuất tạo ra nguyên liệu sản xuất thuốc sẽ đóng góp lớn cho lợi ích kinh tế, môi trường và khoa học công nghệ.

 

Mục tiêu:

- Xây dựng quy trình chiết xuất và chuẩn hóa flavonoid toàn phần.

- Đánh giá độc tính và tác dụng sinh học để hỗ trợ điều trị gút trên thực nghiệm của cao khô vỏ quả lạc.

- Xây dựng quy trình bào chế viên nang cứng Lagute và xây dựng tiêu chuẩn cơ sở của viên nang cứng Lagute.

 

Nội dung nghiên cứu:

- Nghiên cứu xây dựng phương pháp định tính, định lượng flavonoid toàn phần và luteolin.

- Nghiên cứu chuẩn hoá nguyên liệu vỏ quả lạc, cao flavonoid vỏ lạc giầu luteolin.

- Nghiên cứu xây dựng quy trình chiết xuất cao khô từ vỏ quả lạc.

- Nghiên cứu đánh giá tác dụng sinh học và độc tính của cao khô vỏ quả lạc.

- Nghiên cứu xây dựng quy trình bào chế viên nang cứng Lagute từ cao khô vỏ quả lạc.

- Nghiên cứu xây dựng tiêu chuẩn cơ sở đánh giá chất lượng viên nang cứng Lagute.

- Nghiên cứu đánh giá độ ổn định của viên nang cứng thành phẩm.

 

Kết quả của đề tài:

1. Xây dựng được quy trình chiết xuất và chuẩn hóa cao khô toàn phần từ vỏ quả lạc.

a. Đã xây dựng quy trình chiết xuất cao vỏ lạc giầu hàm lượng luteolin >20% với các thông số:

- Dung môi chiết xuất: EtOH 50%.

- Nhiệt độ chiết xuất: Chiết hồi lưu ở nhiệt độ sôi của dung môi (khoảng 90oC)

- Thời gian chiết: chiết 3 lần, mỗi lần 1h.

- Tỉ lệ dược liệu/dung môi: 1/8

- Cất thu hồi dung môi ở áp suất giảm đến cao lỏng 2:1.

- Lắc với EtOAc 3 lần, mỗi lần với tỉ lệ 1:1 so với dịch cao. Gạn lấy phần EtOAc, cất thu hồi dung môi ở áp suất giảm thu được cao khô vỏ lạc.

b. Đã tiêu chuẩn hóa được cao khô vỏ lạc với các tiêu chí yêu cầu kỹ thuật:

+ Tính chất: Cao khô có màu nâu sẫm, vị đắng nhẹ, hơi chát, mùi thơm đặc trưng.

+ Độ ẩm: Không quá 5%.

+ Tro toàn phần: Không quá 10%.

+ Định tính: Chế phẩm thể hiện phép thử định tính của vỏ lạc và Luteolin.

+ Định lượng: Hàm lượng luteolin không thấp hơn 20,0%.

 

2. Đã nghiên cứu đánh giá độc tính và tác dụng sinh học để hỗ trợ điều trị bệnh gút trên thực nghiệm của cao khô.

- Đã nghiên cứu độc tính cấp trên chuột nhắt trắng và độc tính bán trường diễn trên thỏ dùng đường uống của Cao khô vỏ lạc giàu Flavonoid để cho thấy dữ liệu an toàn của Cao bán thành phẩm.

- Đã đánh giá được một số tác dụng dược lý của cao vỏ lạc giầu luteolin (HL > 20%):

+ Trên mô hình in vitro có tác dụng chống oxy hóa mạnh với khả năng dọn gốc tự do DPPH (IC50 : 4,82 µg/ml) và gốc tự do superoxide (IC50: 2,91 µg/ml) và tác dụng ức chế xanthine oxidase mạnh với IC50 là 5,57 µg/ml.

+ Trên mô hình in vitro, cao vỏ lạc tinh chế (luteolin > 20 %) an toàn, không thể hiện độc tính cấp khi không xác định được LD50 ở liều tối đa của phép thử. Cao vỏ lạc thể hiện tác dụng chống viêm cấp trên mô hình gây phù bàn chân chuột bằng carragenin tại liều thử nghiệm 100 mg, 200 và 500 mg/kg thể trọng chuột, làm giảm độ phù chân chuột lần lượt 17,3; 28,3 và 46,4 % sau 3 giờ và 33,9; 44,3 và 58,7 sau 4 giờ so với lô chứng bệnh lý (P < 0,05). Đã đánh giá được tác dụng làm hạ acid uric trong huyết thanh chuột thực nghiệm của cao chiết vỏ lạc (luteolin >20%) trên mô hình chuột toan huyết bởi kali oxonate ở các liều điều trị 100; 200; và 500 mg/kg thể trọng, sau 1 ngày điều trị đều làm giảm nồng độ acid uric trong huyết thanh so với nhóm chứng bệnh lý lần lượt 18,6; 26,1 và 32,2 %, với allopurinol ở mức liều 10 mg/kg làm giảm nồng độ acid uric huyết tương là 40,4 %. Cao chiết vỏ lạc có tác dụng làm hạ acid uric máu trên chuột thực nghiệm với liều thử nghiệm 500 mg/kg thể trọng trên chuột, nghĩa là tương ứng là 3000 mg/ngày/người (theo hướng dẫn của tổ chức Y tế thế giới về ngoại suy liều giữa các loài động vật), đây là cơ sở làm tiền đề để tính liều cho nghiên cứu phát triển sản phẩm hỗ trợ điều trị bệnh gút và các bệnh tăng acid uric máu trên người, liều dự kiến 3000 mg/ngày/người - tương ứng uống khoảng 10 viên nang bào chế được.

 

3. Đã xây dựng được quy trình bào chế viên nang cứng LAGUTE và xây dựng tiêu chuẩn đánh giá chất lượng viên nang cứng LAGUTE.

 

- Đã xây dựng được công thức và quy trình bào chế viên nang Lagute quy mô 10.000 viên/mẻ ổn định:

Nguyên liệu	Khối lượng 1 viên (mg)	Khối lượng 1 lô (g)	Hư hao (%)	KL cân thực (g)
Cao vỏ lạc	350	3500	5%	3675
MgCO3	52,5	525	10	577.5
Avicel	82,5	825	10	907.5
Talc	10	100	10	110
Nang số 0	1	10000	1	10100